ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ БЕЛКА В БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ ПО СПЕКТРАМ КОМБИНАЦИОННОГО РАССЕЯНИЯ СВЕТА

<jats:p>Исследованы возможности методики определения концентрации белка в биологической жидкости по спектрам комбинационного рассеяния света сухого остатка после испарения воды в случае, когда доля белка в жидкости мала по сравнению с небелковыми компонентами. Для подавления вкладов в спектр комбинационного рассеяния света от небелковых органических веществ предлагается использовать осаждение белка трихлоруксусной кислотой в жидкости перед получением сухого остатка. Для получения количественного значения массовой доли белка предлагается использовать добавление в жидкость белка лизоцима, обладающего уникальными особенностями в спектре комбинационного рассеяния света. Показано, что анализ спектров комбинационного рассеяния света сухого остатка с лизоцимом, осаждённого трихлоруксусной кислотой, позволяет определять массовую долю белка в диапазоне от 0,03 мг/мл и выше. Методика также апробирована на примере кондиционированных жидкостей после культивирования фибробластов и миофибробластов роговицы, и показана возможность получения достоверных значений концентрации белка.</jats:p> <jats:p>The potential of a method for determining protein concentration in biological fluids using Raman spectra of the dry residue after water evaporation is investigated. The method is used when the protein content in the liquid is low compared to non-protein components. To suppress contributions to the Raman spectrum from non-protein organic substances, protein precipitation with trichloroacetic acid (TCA) in the liquid before obtaining the dry residue is proposed. To obtain a quantitative value for the mass fraction of protein, it is proposed to add lysozyme, a protein with unique Raman spectral properties, to the liquid. It is shown that analysis of the Raman spectra of the dry residue with lysozyme precipitated with TCA allows determination of the mass fraction of protein in the range of 0.03 mg/ml and higher. The method is also tested using conditioned fluids after culturing corneal fibroblasts and myofibroblasts, demonstrating the feasibility of obtaining reliable protein concentration values.</jats:p>